酶解猪血活性抑菌剂的制备及其免洗洗手液的研制

【摘要】在我国，猪血资源的利用率很低，不超过10%，其主要原因是猪血中的血红素有颜色和腥味，限制了其应用。一方面，只有少部分的猪血作为食用品、被加工成血粉或发酵血粉作为饲料添加剂。其另一方面用途则可被用于生化制药生产开发肽类试剂、肽类药物和食品添加剂。如何对猪血进行深加工利用其血红蛋白资源已成为目前动物蛋白领域的研究热点之一。本文以猪血为原料，考察了对猪血有限酶解提取猪血抑菌剂产生影响的因素，如酶的种类、酶解时间、酶用量、酶解温度等，在对各个因素进行了单因素考察后，利用正交试验方法对猪血有限酶解提取猪血抑菌剂的条件进行优化，得到最优的酶解工艺：选择胰蛋白酶，酶解时间16h，酶解温度35℃，酶用量0.8mg/ml（IU=250U/g）。三次平行试验的抑菌效价（抑菌圈）为25.41mm，24.06mm，25.77mm，平均数值为25.08mm，对比正交试验的最优值后其相对误差为0.98%。对猪血抑菌剂的抑菌活性进行了研究，通过最小抑菌浓度试验、最小杀菌浓度试验和Time-Killer试验得出结论：猪血抑菌剂对5种标准菌株（大肠杆菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853、肺炎链球菌ATCC49619、白色念珠菌ATCC10231）的MIC值依次为125μg·mL-1、125μg·mL-1、125μg·mL-1、62.5μg·mL-1、1000μg·mL-1;MBC值依次为125μg·mL-1、125μg·mL-1、250μg·mL-1、62.5μg·mL-1、2000μg·mL-1。在对5中菌株的TimeKiller试验中，样品对大肠杆菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853、肺炎链球菌ATCC49619杀灭作用较好，平均在10分钟内杀灭率达到90%以上，而对于白色念珠菌的杀灭效果一般，在10分钟后其菌落数仍能维持一定数量级。以猪血抑菌剂为杀菌成分，以基质卡波姆、甘油为主要辅料，制备了具有良好杀菌效果的免洗洗手液。通过响应面试验，优化了以猪血抑菌剂为有效成分的免洗洗手液的配方：猪血抑菌剂含量50%、甘油含量4%、卡波姆含量0.34%条件下制备免洗洗手液其抑菌活性（抑菌圈）可达到最大值29.81mm。三次平行试验的抑菌活性（抑菌圈）分别为29.73mm、29.52mm、29.80mm，其与预测值的相对误差1.20%。对以猪血抑菌剂为杀菌成分的免洗洗手液的理化指标、微生物指标和稳定性进行了探究，本洗手液各项指标均符合GB19877.1-2005特种洗手液国家标准的各项规定，在对其进行1年的稳定性监测后，证明其杀菌性能良好，性质稳定，具有1年以上的保质期。
【作者】吴浪；
【导师】周杰；
【作者基本信息】吉林大学，生物化学与分子生物学，2014，硕士
【关键词】血红蛋白；有限酶解；猪血抑菌剂；免洗洗手液；

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